白细胞移动抑制试验

已致敏的淋巴细胞在体外培养中受到特异性抗原的刺激,会释放多种淋巴因子,其中包括移动抑制因子。

检查细节、注意事项、步骤、结果解读

白细胞移动抑制试验——检查项目的不适宜人群:

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白细胞移动抑制试验——检查项目的注意细节:

(1)为防止污染影响结果,所有器材均要求无菌,操作过程要求在无菌条件下进行。

(2)毛细管内径要求一致。

(3)在毛细管中灌注细胞时,细胞液要充分混匀,以免因各管浓度差异影响结果。

白细胞移动抑制试验——检查项目的一般步骤:

(1)取肝素抗凝血3~5ml,用分层液分离白细胞,用Hank液洗两次,计数后用细胞培养液配成8×107细胞/ml。

(2)将白细胞悬液分装于毛细管中,方法同前。每3ml血可分装8~10只毛细管。装入各毛细管中的淋巴细胞液要求相等。用火焰将毛细管一端封闭,置水平离心机内离心1000r/min,10min。离心后细胞被压紧呈4~6mm高,表层发自主要是白细胞,下层发红为红白细胞混杂。在细胞与液体交界处锯断毛细管用少量凡士林将封闭端黏在培养小室底层,每个小室可放1~2只毛细管。

(3)每3~4只毛细管分为一组,其中一组小室中加满培养液,另一组或几组小室中加满含有一定浓度抗原的培养液(注意勿使毛细管和培养小室中留有气泡)。小室用盖玻片封闭,置水平位于37℃孵育24h,同上法测量毛细管中白细胞移动面积,试验结果用移动指数(MI)表示。

白细胞移动抑制试验——检查项目结果解读:

(1)取肝素抗凝血3~5ml,用分层液分离白细胞,用Hank液洗两次,计数后用细胞培养液配成8×107细胞/ml。

(2)将白细胞悬液分装于毛细管中,方法同前。每3ml血可分装8~10只毛细管。装入各毛细管中的淋巴细胞液要求相等。用火焰将毛细管一端封闭,置水平离心机内离心1000r/min,10min。离心后细胞被压紧呈4~6mm高,表层发自主要是白细胞,下层发红为红白细胞混杂。在细胞与液体交界处锯断毛细管用少量凡士林将封闭端黏在培养小室底层,每个小室可放1~2只毛细管。

(3)每3~4只毛细管分为一组,其中一组小室中加满培养液,另一组或几组小室中加满含有一定浓度抗原的培养液(注意勿使毛细管和培养小室中留有气泡)。小室用盖玻片封闭,置水平位于37℃孵育24h,同上法测量毛细管中白细胞移动面积,试验结果用移动指数(MI)表示。

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