脱氧核糖核酸染色

脱氧核糖核酸是组成细胞核的成分,与特殊染液作用,被染成浅红色或紫红色。

检查细节、注意事项、步骤、结果解读

脱氧核糖核酸染色——检查项目的不适宜人群:

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脱氧核糖核酸染色——检查项目的注意细节:

操作中4~6每次均需用0.1mol/L磷酸盐缓冲液冲洗2次,以免沉渣出现。浸入DAB溶液作用应避光操作。DAB为致癌剂应注意皮肤防护。

脱氧核糖核酸染色——检查项目的一般步骤:

(1)新鲜抗凝血标本,用比重1.077的淋巴细胞分离液作密度梯度分离,取淋巴细胞层细胞离心涂片,空气干燥。或不作细胞分离,直接涂片。

(2)涂片用过氧化氢-甲醇液于4℃下固定20~30min,以阻断细胞的内源性过氧化酶。

(3)涂片在0.1mol/L磷酸盐缓冲液中浸泡15min,滴加正常兔血清,以减少抗体非特异性结合。

(4)滴加兔抗牛TdT抗体,37℃保温30min。

(5)滴加羊抗兔IgG抗体,37℃保温30min。

(6)滴加PAP免疫复合物,37℃保温30min。

(7)将涂片浸入DAB溶液,室温作用5~10min。

(8)水洗5min,干后镜检,或用哈氏苏木素染液复染胞核10min。

脱氧核糖核酸染色——检查项目结果解读:

(1)新鲜抗凝血标本,用比重1.077的淋巴细胞分离液作密度梯度分离,取淋巴细胞层细胞离心涂片,空气干燥。或不作细胞分离,直接涂片。

(2)涂片用过氧化氢-甲醇液于4℃下固定20~30min,以阻断细胞的内源性过氧化酶。

(3)涂片在0.1mol/L磷酸盐缓冲液中浸泡15min,滴加正常兔血清,以减少抗体非特异性结合。

(4)滴加兔抗牛TdT抗体,37℃保温30min。

(5)滴加羊抗兔IgG抗体,37℃保温30min。

(6)滴加PAP免疫复合物,37℃保温30min。

(7)将涂片浸入DAB溶液,室温作用5~10min。

(8)水洗5min,干后镜检,或用哈氏苏木素染液复染胞核10min。

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